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用一分鐘時間帶您正確認識C18色譜柱的使用方法
發布時間:2022-06-27   點擊次數:627次
  C18色譜柱根據極性分為正相柱和反相柱。正相柱大多以硅膠為柱,或是在硅膠表面鍵合-CN、-NH3等官能團的鍵合相硅膠柱;反相柱填料主要以硅膠為基質,在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團(ODS)稱為C18柱,其它常用的反相柱還C8、C4、C2和苯基柱等。
 
  C18色譜柱的構造:
  由柱管、壓帽、卡套、篩板、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應,不銹鋼柱內壁多經過拋光。也有人在不銹鋼柱內壁涂敷氟塑料以提高內壁的光潔度,其效果與拋光相同還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細管柱。
  色譜柱兩端的柱接頭內裝有篩板,是燒結不銹鋼或鈦合金,取決于填料粒度,目的是防止填料漏出,柱內徑一般是根據柱長、填料粒徑和折合流速來確定,目的是為了避免管壁效應。
 
  C18 色譜柱的使用方法:
  1、新柱活化:新的色譜柱活化:采用100%甲醇1ml/min沖洗60min,再換成流動相進行平衡;如果流動相中含有緩沖鹽,在換成流動相前,請使用過渡流動相過渡后再換流動相平衡;
  2、色譜柱保存溶液與評價報告一致。
  3、在使用過程中如果流動相沒有磷酸緩沖鹽的存在,新柱子在使用之前需用100%的甲醇以0.5~1.0的流速平衡30min左右,進流動相,待系統基線平穩直接進樣即可。做完實驗再用100%的純甲醇以0.5~1.0的流速沖洗30min左右,最后用100%的純甲醇保存。
  4、在使用過程中如果流動相有磷酸緩沖鹽的存在,新柱在使用之前需用10%的甲醇水溶液以0.5~1.0的流速沖洗60min左右,將新柱高濃度甲醇溶液完全置換掉,進流動相,待系統基線平穩直接進樣即可。做完實驗再用10%的甲醇(色譜純)水溶液以0.5~1.0的流速沖洗60min左右,將色譜柱中緩沖鹽溶液完全置換掉,最后用100%的純甲醇清洗色譜柱30min,最后用純甲醇保存色譜柱。
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